Syntéza peptidov

Peptidy sa používajú na prípravu protilátok špecifických pre epitopy, mapovanie epitopov protilátok a väzbových miest enzýmov a na navrhovanie nových enzýmov, liekov a vakcín. Kým v minulosti bola syntéza peptidov náročná na prácu a výťažnosť bola nízka, vďaka zdokonaleným metódam výroby a peptidovej chémii sa syntéza peptidov sprístupnila pre všeobecné výskumné použitia.

Syntéza peptidov sa charakterizuje ako tvorba peptidovej väzby medzi dvoma aminokyselinami. Hoci neexistuje konečná definícia peptidu, zvyčajne sa týmto pojmom označujú flexibilné reťazce (s malou sekundárnou štruktúrou) obsahujúce max. 30 – 50 aminokyselín.

Schopnosť vytvárať peptidové väzby na spájanie aminokyselín je stará viac ako 100 rokov, hoci prvé syntetizované peptidy vrátane oxytocínu a inzulínu sa objavili až o ďalších 50 – 60 rokov neskôr, čo dokazuje, ako náročná je chemická syntéza reťazcov aminokyselín. Za posledných 50 rokov sa v chémii a metódach syntézy proteínov dosiahol taký veľký pokrok, že syntéza peptidov je dnes bežným postupom aj vo veľkokapacitnom biologickom výskume a pri vývoji produktov a liekov.

Výhodou dnešných stratégií syntézy peptidov je, že okrem možnosti vytvoriť peptidy, ktoré sa nachádzajú v biologických vzorkách, možno využiť kreativitu a predstavivosť na vytvorenie jedinečných peptidov na optimalizáciu požadovanej biologickej reakcie alebo iného výsledku.

Použitia syntetických peptidov

Vynález syntézy peptidov v päťdesiatych a šesťdesiatych rokoch podnietil rozvoj rôznych aplikačných oblastí, v ktorých sa syntetické peptidy v súčasnosti používajú, vrátane vývoja pre epitop špecifických protilátok proti patogénnym proteínom, štúdia funkcií proteínov a identifikácie a charakterizácie proteínov. Okrem toho sa syntetické peptidy používajú na štúdium interakcií enzýmu a substrátu v rámci dôležitých tried enzýmov, ako sú kinázy a proteázy, ktoré zohrávajú kľúčovú úlohu pri bunkovej signalizácii.

V bunkovej biológii sa väzba na receptory alebo špecifickosť rozpoznávania substrátov novoobjavených enzýmov môže často skúmať pomocou súborov homologických syntetických peptidov. Syntetické peptidy sa môžu podobať prirodzene sa vyskytujúcim peptidom a pôsobiť aj ako liečivá napr. proti rakovine a iným závažným ochoreniam. Syntetické peptidy sa používajú aj ako štandardy a reagencie v aplikáciách založených na hmotnostnej spektrometrii (MS). Syntetické peptidy zohrávajú ústrednú úlohu pri objavovaní, charakterizácii a kvantifikácii proteínov na báze MS, najmä tých, ktoré slúžia ako včasné biomarkery ochorení.

Syntéza peptidov na pevnej fáze (SPPS)

Syntéza na pevnej fáze je bežnou metódou syntézy peptidov. Pri metóde SPPS sa peptidy zvyčajne syntetizujú zo strany karbonylovej skupiny (C-koniec) na stranu aminoskupiny (N-koniec) aminokyselinového reťazca, hoci biologicky sa peptidy v bunkách syntetizujú opačným smerom. Pri syntéze peptidov sa aminokyselina chránená aminoskupinou viaže na materiál pevnej fázy alebo živicu (najčastejšie slabo zosieťované polystyrénové guľôčky), pričom sa medzi karbonylovou skupinou a živicou vytvorí kovalentná väzba, najčastejšie amidová alebo esterová väzba. Potom sa zruší ochrana aminoskupiny a tá reaguje s karbonylovou skupinou ďalšej N-chránenej aminokyseliny. Pevná fáza teraz nesie dipeptid. Tento cyklus sa opakuje, aby sa vytvoril požadovaný peptidový reťazec. Po ukončení všetkých reakcií sa syntetizovaný peptid odštiepi od guľôčky.

Medzi najčastejšie používané ochranné skupiny pre aminoskupiny pri syntéze peptidov patria 9-fluórenylmetyloxykarbonylová skupina (Fmoc) a t-butyloxykarbonyl (Boc). Mnohé aminokyseliny majú v bočnom reťazci funkčné skupiny, ktoré musia byť špeciálne chránené pred reagovaním s prichádzajúcimi N-chránenými aminokyselinami. Na rozdiel od skupín Boc a Fmoc musia byť tieto skupiny v priebehu syntézy peptidov stabilné, hoci sa odstraňujú aj počas konečného zrušenia ochrany (deprotekcie) peptidov.

Naše peptidy sú vyrobené z aminokyselín a boli chemicky syntetizované metódou syntézy peptidov na pevnej fáze (1. syntéza, 2. štiepenie, 3. purifikácia, 4. lyofilizácia). Zložky a hotové produkty sa nezískali zo žiadnej živočíšnej ani bunkovej kultúry a neobsahujú žiadne živočíšne ani bunkové kultúry.

Nie sú určené na humánne použitie. Používajú sa len na výskum in vitro, ako sú napr. štúdie väzby receptora s ligandom, testy enzýmovej aktivity, testy bunkovej proliferácie, testy bunkovej signalizácie, mapovanie epitopov a analytické štúdie.

Upozornenie
Tovar ponúkaný predávajúcim prostredníctvom internetového obchodu je určený výlučne na vedecký a výskumný účel. Tovar ponúkaný predávajúcim predstavuje chemické látky, ktoré sa nesmú použiť pre ľudí alebo zvieratá, ako potraviny, potravinárske prídavné látky, lieky, zdravotnícke pomôcky, kozmetika pre ľudí alebo zvieratá. Žiadny z produktov ponúkaných predávajúcim nie je možné považovať za jedlo, prísadu do jedla, liek, výživnú látku, kozmetiku ani inú látku určenú na použitie pre ľudí alebo zvieratá. Žiaden z týchto produktov nemôže byť použitý na diagnostické alebo terapeutické účely.